小影像、大圖景：人工智能將徹底改變顯微鏡技術(shù)

 

  20年前，計(jì)算生物學(xué)家Anne Carpenter在完成博士學(xué)位時(shí)，第一次意識(shí)到需要學(xué)習(xí)計(jì)算機(jī)編程。

  Carpenter在麻省理工學(xué)院和哈佛大學(xué)的布羅德研究所管理著一個(gè)實(shí)驗(yàn)室。當(dāng)時(shí)，她記得自己要么將面對(duì)長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月的人工圖像分析，要么選擇讓顯微鏡自己運(yùn)行。她選擇了后者。自那以后，這種自動(dòng)化方法顯示出了它解決或者至少開始解決一些限制科學(xué)家使用顯微鏡技術(shù)手動(dòng)觀察細(xì)胞運(yùn)作問題的潛力。例如，自動(dòng)化可以減少識(shí)別細(xì)胞變化的耗時(shí)和細(xì)致工作。

  Carpenter的實(shí)驗(yàn)室專注于使用軟件來(lái)分析數(shù)百萬(wàn)張圖像中包含的細(xì)胞形態(tài)數(shù)據(jù)，以加速藥物研發(fā)。“在藥物研發(fā)過程中會(huì)遇到很多瓶頸，而來(lái)自這些圖像的數(shù)據(jù)被證明對(duì)解決每一個(gè)瓶頸都很有用：從建立更好的疾病相關(guān)檢測(cè)和篩選庫(kù)，到預(yù)測(cè)分析結(jié)果和毒性。”她說(shuō)。

 

管理的局限性

 

  位于得克薩斯州休斯敦的萊斯大學(xué)生物工程學(xué)教授Rebecca Richards-Kortum目前正與MD安德森癌癥中心合作，解決傳統(tǒng)顯微鏡技術(shù)的一些基本局限性。當(dāng)使用傳統(tǒng)顯微鏡時(shí)，在景深（DOF）和空間分辨率之間有一個(gè)固定的權(quán)衡：所需的空間分辨率越高，景深就越窄。該團(tuán)隊(duì)與萊斯大學(xué)的Ashok Veeraraghavan和MD安德森癌癥中心的Ann Gillenwater合作，開發(fā)了一種名為DeepDOF的計(jì)算顯微鏡，其可以在保持分辨率的同時(shí)實(shí)現(xiàn)比傳統(tǒng)顯微鏡大5倍的景深，顯著減少了圖像處理所需的時(shí)間。

  Richards-Kortum解釋稱，DeepDOF使用了放置在顯微鏡孔徑處的優(yōu)化相位掩模和基于深度學(xué)習(xí)的算法，該算法將傳感器數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為高分辨率、大光圈景深的圖像。

  “鑒于其低成本、高速和自動(dòng)化分析能力，我們希望DeepDOF的觀察范圍有助于手術(shù)中準(zhǔn)確評(píng)估口腔癌腫瘤邊緣病變組織的數(shù)量。”她說(shuō)道，“準(zhǔn)確評(píng)估病變組織的能力有助于優(yōu)化手術(shù)切除結(jié)果，特別是在資源有限的環(huán)境下，如農(nóng)村地區(qū)。”

  她表示，使用顯微鏡和人工智能開發(fā)創(chuàng)新醫(yī)療技術(shù)的最大挑戰(zhàn)之一，是展示它們益處的必要性。

  為計(jì)算顯微鏡提供動(dòng)力的深度學(xué)習(xí)算法需要大型數(shù)據(jù)集來(lái)訓(xùn)練它們獨(dú)立執(zhí)行任務(wù)的能力，但這樣的數(shù)據(jù)集并不總是現(xiàn)成的。然后，必須評(píng)估這些算法的性能，將其與當(dāng)前的分析標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。“這是整個(gè)醫(yī)療保健技術(shù)領(lǐng)域面臨的共同挑戰(zhàn)。”她說(shuō)。

 

應(yīng)對(duì)挑戰(zhàn)

 

  Ricardo Henriques負(fù)責(zé)位于葡萄牙的古爾本基安研究所的光學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。他的跨學(xué)科團(tuán)隊(duì)——由光學(xué)物理學(xué)家、計(jì)算機(jī)科學(xué)家和生物醫(yī)學(xué)研究人員組成——致力于改善現(xiàn)有成像技術(shù)的局限性。該團(tuán)隊(duì)專注于兩個(gè)關(guān)鍵挑戰(zhàn)：如何分析病毒感染活細(xì)胞的實(shí)時(shí)行為，以及如何建立智能顯微鏡技術(shù)，以減少在觀察過程中光對(duì)生物系統(tǒng)造成的損害，即光毒性。

  為了更好的設(shè)想，他建議把細(xì)胞比作足球運(yùn)動(dòng)員。“你想拍攝一場(chǎng)足球比賽，但攝影機(jī)的某些東西對(duì)球員來(lái)說(shuō)是有毒的。為了降低他們的風(fēng)險(xiǎn)，你必須盡量減少拍攝時(shí)間，但也需要做出正確的決定，捕捉那些有助于真正理解比賽的關(guān)鍵時(shí)刻。”Henriques說(shuō)。

  Henriques的團(tuán)隊(duì)正在開發(fā)機(jī)器學(xué)習(xí)算法，以便更好地預(yù)測(cè)病毒感染過程中細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵事件何時(shí)發(fā)生，并捕捉這些時(shí)刻。同時(shí)，這些算法將試圖減少捕獲無(wú)關(guān)變化所花費(fèi)的時(shí)間，減少細(xì)胞在有毒環(huán)境中的暴露時(shí)間。

  對(duì)于Henriques來(lái)說(shuō)，建立一個(gè)跨學(xué)科的團(tuán)隊(duì)來(lái)解決這些問題非常重要，因?yàn)檫@項(xiàng)工作涉及多種科學(xué)技能。“我們需要徹底改變思維方式，才能將人工智能全面引入科學(xué)研究。”

  顯微鏡學(xué)所固有的許多學(xué)科，如物理學(xué)和生物學(xué)，由于各領(lǐng)域之間的語(yǔ)言障礙存在自然而然的獨(dú)立工作傾向。“我認(rèn)為各組織正在慢慢地投資建設(shè)橋梁，但還需要做更多工作來(lái)鼓勵(lì)這種做法。”Henriques說(shuō)。

 

建造橋梁

 

  地球科學(xué)家Matt Andrew就職于加利福尼亞州都柏林的ZEISS光學(xué)技術(shù)公司，他的研究重點(diǎn)是多孔巖和沉積巖中的流動(dòng)和運(yùn)輸過程。Andrew說(shuō)，他的工作越來(lái)越集中于開發(fā)技術(shù)，以更好地利用顯微鏡產(chǎn)生的數(shù)據(jù)。他現(xiàn)在與公司的多個(gè)團(tuán)隊(duì)合作，幫助同事將人工智能應(yīng)用到研究實(shí)踐中。

  他說(shuō)，無(wú)論是觀察細(xì)胞還是巖石，無(wú)論他們對(duì)深度學(xué)習(xí)技術(shù)的了解如何，將人工智能引入顯微鏡的日常實(shí)踐的關(guān)鍵，是要確保這項(xiàng)技術(shù)可以被任何科學(xué)家使用。“構(gòu)建能夠釋放深度學(xué)習(xí)的潛力和力量、工作迅速且易于使用的工作流程，對(duì)它們被采用至關(guān)重要。”Andrew表示。

  例如，Andrew和他的團(tuán)隊(duì)使用一個(gè)被稱為“解決方案實(shí)驗(yàn)室”的過程來(lái)構(gòu)建工作流，通過人工智能自動(dòng)檢測(cè)科學(xué)家可能希望調(diào)查的樣本區(qū)域。“你可以使用人工智能來(lái)識(shí)別與個(gè)別特征對(duì)應(yīng)的區(qū)域，然后以更高的分辨率成像。”他補(bǔ)充道，“人工智能技術(shù)通常使用開源庫(kù)和共享組件。我們的技術(shù)之所以如此成功，是因?yàn)槲覀兇_保它們使用起來(lái)更簡(jiǎn)單，而且打包后更容易消化。”

  Andrew認(rèn)為，我們正處于實(shí)現(xiàn)顯微鏡數(shù)據(jù)革命的開端。“回想5年前，我們還不知道可以將這些技術(shù)用于顯微鏡�，F(xiàn)在我們正朝著這樣一個(gè)方向發(fā)展，讓這些算法成為所有工作場(chǎng)所每個(gè)部分的核心。”

  Luciano Guerreiro Lucas是總部位于德國(guó)韋茨拉爾的徠卡顯微系統(tǒng)公司的負(fù)責(zé)人，他專注于創(chuàng)建智能軟件解決方案，以解決生命科學(xué)和生物制藥領(lǐng)域在圖像數(shù)據(jù)方面面臨的一些大問題。在過去的41年里，他的團(tuán)隊(duì)一直在努力建立一個(gè)經(jīng)過預(yù)先訓(xùn)練的深度學(xué)習(xí)模型庫(kù)以及Aivia軟件，其允許任何人利用一些關(guān)鍵的人工智能顯微鏡技術(shù)。

  “現(xiàn)有的工具忽略了這樣一個(gè)事實(shí)，即研究人員可能是生物學(xué)或類似學(xué)科的專家，但在顯微鏡或圖像分析方面的專業(yè)知識(shí)非常有限。”Lucas說(shuō)，“我們正在創(chuàng)造能夠利用生物學(xué)家的專業(yè)知識(shí)并可以從中學(xué)習(xí)的工具。這些工具應(yīng)該逐漸了解什么是細(xì)胞以及它在多種場(chǎng)景下的樣子，并最終自主地進(jìn)行成像和圖像分析，使研究人員能夠?qū)Ｗ⒂诳茖W(xué)發(fā)現(xiàn)過程中的創(chuàng)造性和批判性思維部分。”

  Lucas指出，目前實(shí)現(xiàn)這一想法的挑戰(zhàn)是高質(zhì)量、結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)的供應(yīng)有限，以及缺乏標(biāo)準(zhǔn)的圖像格式。“這些問題使得我們很難在這個(gè)領(lǐng)域取得更大的進(jìn)展。此外，確實(shí)存在的數(shù)據(jù)往往被保存在孤島中。在研究領(lǐng)域，很難就文件和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成廣泛的共識(shí)，研究人員都喜歡用自己的方式做事。”他表示，商業(yè)和學(xué)術(shù)部門需要投入更多時(shí)間，讓學(xué)界了解解決這些問題的好處。

 

數(shù)據(jù)操作

 

  位于加利福尼亞州舊金山的格萊斯頓研究所所長(zhǎng)兼高級(jí)研究員Steven Finkbeiner，過去十年一直走在人工智能和顯微鏡研究前沿。自從發(fā)明了一種可以一次追蹤細(xì)胞數(shù)月的全自動(dòng)機(jī)器人顯微鏡，他和團(tuán)隊(duì)已經(jīng)產(chǎn)生了極其龐大的數(shù)據(jù)。這些信息讓團(tuán)隊(duì)有能力真正探索人工智能的潛力。他說(shuō)：“我們一直在‘無(wú)恥’地使用我們生成的PB級(jí)數(shù)據(jù)。”

  例如，他的團(tuán)隊(duì)正在使用面部識(shí)別人工智能技術(shù)——將細(xì)胞的形態(tài)視為面部進(jìn)行處理，并隨著時(shí)間的推移來(lái)識(shí)別和追蹤復(fù)雜系統(tǒng)（如組織）中的單個(gè)細(xì)胞。“我們希望這些方法能為研究復(fù)雜細(xì)胞—細(xì)胞相互作用的過程（如神經(jīng)炎癥）開辟新的可能性。”

  通過展示神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中來(lái)自患者的細(xì)胞圖像示例，F(xiàn)inkbeiner還教授利用網(wǎng)絡(luò)診斷神經(jīng)退行性疾病，如肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥（ALS）和帕金森病。“我們以一種相對(duì)公正的方式詢問網(wǎng)絡(luò)，看它能否在圖像中找到任何能夠做出準(zhǔn)確診斷的東西，然后我們得到了非常令人鼓舞的結(jié)果。我們希望這能帶來(lái)對(duì)患者進(jìn)行分層的新方法，發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物并開發(fā)有效的個(gè)性化療法。它甚至可能在癥狀出現(xiàn)之前就診斷出患病風(fēng)險(xiǎn)，這將是革命性的。”

  他的團(tuán)隊(duì)還使用人工智能來(lái)預(yù)測(cè)細(xì)胞的未來(lái)命運(yùn)。“為了做到這一點(diǎn)，我們利用縱向單細(xì)胞數(shù)據(jù)和深度學(xué)習(xí)網(wǎng)絡(luò)，尋找一個(gè)細(xì)胞早期特征來(lái)預(yù)測(cè)其命運(yùn)。我們現(xiàn)在正在一個(gè)癌癥項(xiàng)目中使用這種方法，這將有助于理解為什么有些細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生耐藥性，而有些則不會(huì)。”Finkbeiner表示。

 

將人工智能引入實(shí)驗(yàn)室

 

  Rich Gruskin是總部位于紐約梅爾維爾的尼康儀器公司軟件系統(tǒng)高級(jí)總經(jīng)理，他與客戶密切合作，以確保研究人員能夠輕松采用人工智能技術(shù)。

  在最近的一個(gè)案例中，客戶希望在他們的無(wú)標(biāo)記（明視野）圖像數(shù)據(jù)中識(shí)別多種細(xì)胞類型。由于圖像是低對(duì)比度的，有時(shí)只在細(xì)微的形態(tài)特征上有所不同，因此要對(duì)幾個(gè)人工智能網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行訓(xùn)練，使其能在一個(gè)分析實(shí)驗(yàn)中協(xié)同工作，以區(qū)分不同的細(xì)胞類型。

  “我們利用客戶的數(shù)據(jù)集訓(xùn)練了一個(gè)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)并運(yùn)行了它，效果非常好。”他說(shuō)，“如果嘗試新事物有阻力，我們就會(huì)介入，幫助客戶處理信息，建立新的程序，并向他們展示其工作原理。確保應(yīng)用輕松且快速獲得結(jié)果是建立使用新技術(shù)信心的關(guān)鍵。”

 

人工智能的未來(lái)

 

  總體而言，在學(xué)術(shù)和商業(yè)領(lǐng)域工作的研究人員認(rèn)為，將人工智能應(yīng)用于科學(xué)生活的最大障礙是對(duì)未知的恐懼。然而，它與日俱增的影響力是不可否認(rèn)的。

  “變化是在幾個(gè)月內(nèi)而不是幾年內(nèi)發(fā)生的。”Henriques說(shuō)，“看看自動(dòng)駕駛汽車，它們所做的正是我們想用顯微鏡做的事情，實(shí)時(shí)觀察周圍環(huán)境并決定如何與之互動(dòng)，以及如何保持有機(jī)體也就是乘車人的生命安全 。”

  然而也有一種感覺，雖然變化是不可避免的，但社會(huì)需要做出更加堅(jiān)定的承諾，以確保所有科學(xué)家都能從這些新技術(shù)中受益。Finkbeiner認(rèn)為，創(chuàng)建一些公共圖像庫(kù)將對(duì)計(jì)算機(jī)領(lǐng)域有極大幫助，計(jì)算機(jī)科學(xué)家可以使用這些資源開發(fā)新的算法和方法。

  “大學(xué)甚至高中的孩子也可以將數(shù)據(jù)用于教育和培訓(xùn)。”Finkbeiner表示，“這個(gè)領(lǐng)域的潛力是巨大的，現(xiàn)在投資培養(yǎng)我們需要的一代，讓他們真正帶領(lǐng)我們前進(jìn)是非常好的。”

  他還希望學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)能更加重視生物學(xué)家和計(jì)算機(jī)科學(xué)家之間的合作。“擁有計(jì)算機(jī)科學(xué)系并且認(rèn)識(shí)到多學(xué)科價(jià)值的大學(xué)有機(jī)會(huì)發(fā)揮領(lǐng)導(dǎo)作用。計(jì)算機(jī)科學(xué)和生物學(xué)之間的差距很大，我們需要持續(xù)的努力和支持來(lái)點(diǎn)燃火花。”■

 

Sarah O'Meara 是生命科學(xué)領(lǐng)域的自由撰稿人。

鳴謝：“原文由美國(guó)科學(xué)促進(jìn)會(huì)（www.aaas.org）發(fā)布在2021年4月23日《科學(xué)》雜志”。官方英文版請(qǐng)見https://www.science.org/doi/10.1126/science.372.6540.425b。